T调节（Treg）细胞可抑制免疫反应以维持体内平衡。Treg细胞有2个主要子集：FOXP3（叉头盒蛋白3）阳性Treg细胞，不产生高水平的效应细胞因子；1型Treg（Tr1）细胞，它们是FOXP3阴性且分泌白介素（IL）10。 

IL10是一种抗炎细胞因子，因此Tr1细胞可用于治疗炎性肠病。我们旨在开发分离和扩增人类Tr1细胞并定义其功能的方法。 

我们从克罗恩氏病或溃疡性结肠炎患者或健康个体（对照组）获得了血液和结肠活检样本。从血液样本中分离出CD4 + T细胞，并用抗CD3和抗CD28磁珠刺激，然后通过使用IL10细胞因子捕获试验和细胞分选纯化Tr1细胞。 

FOXP3阳性Treg细胞从未刺激的细胞中分类为CD4+ CD25高CD127低细胞。Tr1和FOXP3阳性Treg细胞扩增，并比较了表型和基因表达谱。 

用抗CD3和抗CD28珠刺激健康供体的外周血单核细胞中的T细胞，并测量Tr1和FOXP3阳性Treg细胞的抑制能力。建立人结肠类器官培养物，与Tr1或FOXP3阳性细胞的上清液一起培养，并通过免疫荧光和流式细胞仪进行分析。将T84细胞（人结肠腺癌上皮细胞）与Tr1或FOXP3阳性细胞的上清液一起温育，并测量跨上皮电阻以确定上皮细胞屏障功能。 

从对照组和克罗恩病或溃疡性结肠炎患者中分离出的Tr1细胞表型在扩增后没有显著差异。Tr1细胞和FOXP3阳性Treg细胞抑制效应T细胞的增殖，但只有Tr1细胞抑制髓样细胞分泌IL1B和肿瘤坏死因子。从健康个体和克罗恩氏病或溃疡性结肠炎患者中分离出的Tr1细胞而非FOXP3阳性Treg细胞分泌的IL22可促进人肠上皮细胞的屏障功能。Tr1细胞培养上清液可促进肠道类器官培养物中产生粘蛋白的杯状细胞的分化。 

人类Tr1细胞可抑制效应T细胞的增殖（适应性免疫反应）以及髓样细胞产生IL1B和TNF（内在免疫反应）。它们还分泌IL22以促进屏障功能、它们可能被开发为针对肠炎性疾病的基于细胞的疗法。 

论文信息：

Suppressive and Gut-Reparative Functions of Human Type 1 T Regulatory Cells. Gastroenterology. December 2019 Volume 157,Issue 6, Pages 1584–1598